结肠癌是世界上常见的恶性肿瘤之一,其发生率较高,死亡率约为9.2%。羊肚菌是一种珍稀的食用菌,属盘菌目、羊肚菌科、羊肚菌属,分布在我国的河南、陕西、甘肃、青海、西 藏、新疆、四川、山西、吉林等地区。研究表明,羊肚菌多糖能够提高机体免疫力,诱导HepG2、HT-29等肿瘤细胞凋亡。
目前国内相关研究多以HT-29细胞系为研究对象,对SW620细胞的研究尚未见报道。在汉斯出版社《食品与营养科学》中,有学者以人结肠癌细胞SW620为实验材料,证实了羊肚菌多糖能够抑制结肠癌细胞的体外增殖、迁移、细胞集落形成,诱导结肠癌细胞的凋亡和相关凋亡蛋白的表达,为进一步研究羊肚菌多糖的抗肿瘤作用提供理论依据。
取对数生长期细胞,稀释细胞浓度为5×104/ml,以每孔100μl接种于96孔培养板,在37℃、5%二氧化碳、饱和湿度条件下培养6h;实验设空白试剂组(只含培养基)、对照组和实验组。
细胞贴壁后,实验组加入终浓度分别为400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1000μg/mL、1200μg/mL、1400μg/mL、1600μg/mL的羊肚菌多糖溶液,对照组加入不含羊肚菌多糖的培养液。分别培养24h和48h后,每孔加入MTT10μL,终浓度为500μg/mL,重新放入培养箱中继续培养4小时后终止培养;记录实验结果并按下列公式计算:细胞存活率(%)=(A570实验−A570空白)/(A570对照−A570空白)×100。实验组每个浓度梯度设3个复孔。
研究的数据证明了羊肚菌多糖能够抑制结肠癌细胞SW620的增殖、迁移和细胞集落的形成,诱导癌细胞凋亡。通过凋亡相关蛋白的表达分析显示,促凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达上升,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降。综上所述,羊肚菌多糖通过细胞凋亡的方式抑制了结肠癌细胞SW620的增殖,并且抑制了SW620细胞的迁移和增殖。